ዲናሴ I
DNase I (Deoxyribonuclease I) ነጠላ ወይም ባለ ሁለት ገመድ ዲ ኤን ኤ ሊፈጭ የሚችል endodeoxyribonuclease ነው።ሞኖዴኦክሲንክሊዮታይዶችን ወይም ነጠላ ወይም ባለ ሁለት መስመር ኦሊጎዴኦክሲኑክሊዮታይድ ከፎስፌት ቡድኖች ጋር በ5′-ተርሚናል እና በ3′-ተርሚናል ላይ ሃይድሮክሳይል ለማምረት የፎስፎዲስተር ቦንዶችን ያውቃል እና ይሰነጠቃል።የDNase I እንቅስቃሴ በCa2+ ላይ የሚመረኮዝ ሲሆን እንደ Mn2+ እና Zn2+ ባሉ ዳይቫልንት የብረት ions ሊነቃ ይችላል።5mM Ca2+ ኢንዛይሙን ከሃይድሮሊሲስ ይከላከላል።Mg2+ በሚኖርበት ጊዜ ኢንዛይሙ በዘፈቀደ በማንኛውም የዲኤንኤ ገመድ ላይ ያለውን ማንኛውንም ጣቢያ ሊገነዘብ እና ሊሰነጣጥፍ ይችላል።Mn2+ በሚኖርበት ጊዜ የዲኤንኤ ድርብ ክሮች በተመሳሳይ ቦታ ሊታወቁ እና ሊሰነጣጠቁ በሚችሉበት ቦታ ላይ ጠፍጣፋ የዲ ኤን ኤ ቁርጥራጮች ወይም ተጣባቂ ጫፍ ዲ ኤን ኤ ቁርጥራጮች ከ1-2 ኑክሊዮታይድ ይወጣሉ።
የምርት ንብረት
Bovine Pancreas DNase I የተገለፀው በእርሾ አገላለጽ ስርዓት እና በንጽሕና ነው።
Cተቃዋሚዎች
አካል | ድምጽ | |||
0.1KU | 1KU | 5KU | 50KU | |
ዲናሴ I፣ RNase-ነጻ | 20μL | 200μL | 1 ሚሊ | 10 ሚሊ |
10×DNase I ቋት | 1 ሚሊ | 1 ሚሊ | 5 × 1 ሚሊ | 5 × 10 ሚሊ |
መጓጓዣ እና ማከማቻ
1. የማከማቻ መረጋጋት: - 15 ℃ ~ -25 ℃ ለማከማቻ;
2.Transport Stability: በበረዶ ማሸጊያዎች ስር ማጓጓዝ;
3. የቀረበው በ: 10 mM Tris-HCl, 2 mM CaCl2, 50% glycerol, pH 7.6 በ 25 ℃.
የክፍል ፍቺ
አንድ አሃድ የኢንዛይም መጠን ተብሎ ይገለጻል ይህም 1 μg pBR322 ዲ ኤን ኤ በ10 ደቂቃ ውስጥ በ37 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ውስጥ ሙሉ በሙሉ የሚቀንስ ነው።
የጥራት ቁጥጥር
አርናሴ፡5U of DNase I ከ 1.6 μg MS2 አር ኤን ኤ ጋር ለ 4 ሰአታት በ 37 ℃ በአጋሮዝ ጄል ኤሌክትሮፊዮራይዝስ እንደተወሰነው ምንም አይነት መበላሸት አይሰጥም።
ባክቴሪያ ኢንዶቶክሲን;LAL-ፈተና፣ በቻይና Pharmacopoeia IV 2020 እትም መሠረት፣ የጄል ገደብ ሙከራ ዘዴ፣ አጠቃላይ ህግ (1143)።የባክቴሪያ ኢንዶቶክሲን ይዘት ≤10 EU/mg መሆን አለበት።
የአጠቃቀም መመሪያዎች
1.ከዚህ በታች በተዘረዘሩት መጠን መሰረት የአጸፋውን መፍትሄ በ RNase-free tube ውስጥ ያዘጋጁ።
አካል | ድምጽ |
አር ኤን ኤ | X μg |
10 × ዲናሴ I ቋት | 1 μL |
ዲናሴ I፣ አርናሴ-ነጻ(5U/μL) | 1 ዩ በ μg አር ኤን ኤ |
ddH2O | እስከ 10 μL |
2.37 ℃ ለ 15 ደቂቃዎች;
3. ምላሹን ለማስቆም የማቋረጫ ቋት ይጨምሩ እና በ 65 ℃ በ 65 ℃ ለ 10 ደቂቃዎች ያሞቁ DNase I ን ለማንቃት ናሙናው በቀጥታ ለሚቀጥለው የፅሁፍ ሙከራ ጥቅም ላይ ሊውል ይችላል።
ማስታወሻዎች
1.በአንድ μg አር ኤን ኤ 1U DNase I ይጠቀሙ ወይም 1U DNAse I ከ 1μg ያነሰ አር ኤን ኤ ይጠቀሙ።
2.EDTA ኢንዛይም በማይሰራበት ጊዜ አር ኤን ኤ እንዳይበላሽ ለመከላከል ወደ 5 ሚሜ የመጨረሻ ክምችት መጨመር አለበት።