Bst 2.0 ዲኤንኤ ፖሊመሬሴ (ከግሊሰሮል ነፃ)
Bst DNA polymerase V2 ከ Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I የተገኘ ነው፣ እሱም 5′→3′ የዲኤንኤ ፖሊሜሬሴ እንቅስቃሴ እና ጠንካራ የሰንሰለት መተኪያ እንቅስቃሴ ያለው፣ነገር ግን 5′→3′ exonuclease እንቅስቃሴ የለውም።Bst DNA Polymerase V2 ለስትራንድ ማፈናቀል፣ ለአይኦተርማል ማጉላት LAMP (Loop mediated isothermal amplification) እና ለፈጣን ቅደም ተከተል ተስማሚ ነው።
አካላት
| አካል | HC5005A-01 | HC5005A-02 | HC5005A-03 |
| BstDNApolymerase V2(ከግላይሰሮል ነፃ የሆነ)(8U/μL) | 0.2 ሚሊ | 1 ሚሊ | 10 ሚሊ |
| 10×HC Bst V2 ቋት | 1.5 ሚሊ ሊትር | 2 × 1.5 ሚሊ | 3 × 10 ሚሊ |
| ኤምጂኤስኦ4(100ሚሜ) | 1.5 ሚሊ ሊትር | 2 × 1.5 ሚሊ | 2 × 10 ሚሊ |
መተግበሪያዎች
1.LAMP isothermal ማጉላት
2.DNA strand ነጠላ መፈናቀል ምላሽ
3.High GC ጂን ቅደም ተከተል
የ nanogram ደረጃ 4.DNA ቅደም ተከተል.
የማከማቻ ሁኔታ
ከ 0 ዲግሪ ሴንቲግሬድ በታች መጓጓዣ እና በ -25 ° ሴ ~ -15 ° ሴ ውስጥ ይቀመጣል.
የክፍል ፍቺ
አንድ ክፍል በ 30 ደቂቃ ውስጥ በ 65 ዲግሪ ሴንቲግሬድ ውስጥ 25 nmol dNTP በአሲድ የማይሟሟ ቁስ ውስጥ የሚያካትት የኢንዛይም መጠን ይገለጻል።
የጥራት ቁጥጥር
1.የፕሮቲን ንፅህና ጥናት (SDS-ገጽ):የBst DNA polymerase V2 ንፅህና ≥99% የሚወሰነው በSDS-PAGE ትንተና Coomassie Blue ማወቂያን በመጠቀም ነው።
2.የ Exonuclease እንቅስቃሴ:ቢያንስ 8 ዩ ቢኤስት ዲ ኤን ኤ ፖሊመሬሴ V2 በ1 μg λ -Hind Ⅲ ዲጄስት ዲኤንኤን ለ16 ሰአታት በ37 ℃ የያዘ የ50 μL ምላሽ እንደተወሰነው ሊታወቅ የሚችል ብልሽት አያስከትልም።
3.የኒኬሴስ እንቅስቃሴ:ቢያንስ 8 ዩ ቢኤስት ዲ ኤን ኤ ፖሊመሬሴ V2 ከ1 μg pBR322 ዲኤንኤ ጋር ለ16 ሰአታት በ37°C የያዘ የ50 μL ምላሽ እንደተወሰነው ሊታወቅ የሚችል ብልሽት አያስከትልም።
4.RNase እንቅስቃሴ:ቢያንስ 8 ዩ ቢኤስት ዲኤንኤ polymerase V2 ከ1.6 μg MS2 አር ኤን ኤ ጋር ለ16 ሰአታት በ37°C የያዘ የ50 μL ምላሽ እንደተወሰነው ሊታወቅ የሚችል ብልሽት አያስከትልም።
5.ኢ.ኮሊ ዲ ኤን ኤ፡120 ዩ Bst DNA polymerase V2 ለኢ.ኮሊ ጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ በ TaqMan qPCR በመጠቀም ለኢ.ኮሊ 16S አር ኤን ኤ ሎከስ ልዩ ፕሪመርሮች ይጣራሉ።የኢ.ኮሊ ጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ መበከል ≤1 ቅጂ ነው።
LAMP ምላሽ
| አካላት | 25μL |
| 10×HC Bst V2 ቋት | 2.5 ማይልስ |
| ኤምጂኤስኦ4 (100ሚሜ) | 1.5 ማይልስ |
| ዲኤንቲፒ (እያንዳንዳቸው 10ሚሜ) | 3.5 ማይልስ |
| SYTO™ 16 አረንጓዴ (25×)a | 1.0 μኤል |
| የፕሪመር ድብልቅb | 6 μኤል |
| Bst DNA Polymerase V2 (ከግላይሰሮል ነፃ የሆነ) (8 U/ul) | 1 μL |
| አብነት | × μL |
| ddH₂O | እስከ 25 μl |
ማስታወሻዎች፡-
1) ሀ.SYTOTM 16 አረንጓዴ (25×): በሙከራ ፍላጎቶች መሰረት, ሌሎች ቀለሞችን እንደ ምትክ መጠቀም ይቻላል;
2) ለ.ዋና ድብልቅ፡ 20 µ ኤም FIP፣ 20 μM BIP፣ 2.5 µ M F3፣ 2.5 µ M B3፣ 5 µ M LF፣ 5 μM LB እና ሌሎች ጥራዞችን በማቀላቀል የተገኘ።
ምላሽ እና ሁኔታ
1 × HC Bst V2 Buffer፣ የማቀፊያው ሙቀት በ60°ሴ እና በ65°ሴ መካከል ነው።
የሙቀት ማነቃቂያ
80 ° ሴ, 20 ደቂቃዎች
