ዲናሴ I (Rnase ነፃ) (5u/ul)
የድመት ቁጥር: HC4007A
DNase I (Deoxyribonuclease I) ነጠላ ወይም ባለ ሁለት ገመድ ዲ ኤን ኤ ሊፈጭ የሚችል endodeoxyribonuclease ነው።ሞኖዴኦክሲንክሊዮታይዶችን ወይም ነጠላ ወይም ባለ ሁለት መስመር ኦሊጎዴኦክሲኑክሊዮታይድ ከፎስፌት ቡድኖች ጋር በ5'-ተርሚናል እና በ3'-ተርሚናል ላይ ሃይድሮክሳይል ለማምረት የፎስፎዲስተር ቦንዶችን ያውቃል እና ይሰነጠቃል።የDNase I እንቅስቃሴ በ Ca2+እና እንደ ኤምኤን ባሉ በዲቫሌንት የብረት ions ሊነቃ ይችላል2+እና Zn2+.5 ሚሜ ካ2+ኢንዛይሙን ከሃይድሮሊሲስ ይከላከላል.ኤም.ጂ2+, ኢንዛይሙ በዘፈቀደ በማንኛውም የዲኤንኤ ገመድ ላይ ያለውን ማንኛውንም ጣቢያ ሊገነዘብ እና ሊሰነጣጥፍ ይችላል።በ Mn ፊት2+የዲኤንኤ ድርብ ክሮች በአንድ ጊዜ ሊታወቁ እና ሊሰነጣጠቁ የሚችሉበት ቦታ ላይ ማለት ይቻላል ጠፍጣፋ የዲ ኤን ኤ ቁርጥራጮች ወይም ተጣባቂ የፍጻሜ ዲ ኤን ኤ ቁርጥራጮች ከ1-2 ኑክሊዮታይድ ይወጣሉ።
አካላት
| ስም | 0.1KU | 1KU | 5 KU | 50 KU |
| ዲናሴ I፣ RNase-ነጻ | 20μL | 200μL | 1 ሚሊ | 10 ሚሊ |
| 10×DNase I ቋት | 1 ሚሊ | 1 ሚሊ | 5 × 1 ሚሊ | 5 × 10 ሚሊ |
የማከማቻ ሁኔታዎች
-25 ℃ ~ -15 ℃ ለማከማቻ;በበረዶ ማሸጊያዎች ስር ማጓጓዝ.
መመሪያዎች
1. ከዚህ በታች በተዘረዘሩት መጠኖች መሰረት የምላሽ መፍትሄን ከ RNase-free tube ውስጥ ያዘጋጁ።
| አካል | ድምጽ |
| አር ኤን ኤ | X µg |
| 10 × ዲናሴ I ቋት | 1μL |
| ዲናሴ I፣ አርናሴ-ነጻ(5U/μL) | 1 ዩ በµg RNA① |
| ddH2O | እስከ 10μL |
ማሳሰቢያ፡ ①በአር ኤን ኤ መጠን መሰረት መጨመር ያለበትን የDNase I መጠን አስሉ።
2. 37 ℃ ለ 15 ደቂቃዎች;
3. በመጨረሻው የ 2.5mM~5mM 0.5M EDTA ይጨምሩ እና ምላሹን ለማቆም በ 65 ℃ ለ 10 ደቂቃዎች ያሞቁ።ናሙናው ለቀጣዩ ምላሽ ለምሳሌ በግልባጭ መገለባበጥ በቀጥታ ጥቅም ላይ ሊውል ይችላል።ሙከራ.
የክፍል ፍቺ
አንድ ክፍል 1µg pBR322 ሙሉ በሙሉ የሚቀንስ የኢንዛይም መጠን ተብሎ ይገለጻል።ዲ ኤን ኤ በ 10 ደቂቃ ውስጥ በ 37 ℃.
የጥራት ቁጥጥር
አርናሴ፡5U of DNase I ከ1.6µg MS2 አር ኤን ኤ ጋር ለ4 ሰአታት በ37℃ ላይ ምንም አይነት ውድቀት አያመጣም።በ agarose gel electrophoresis ይወሰናል.
ማስታወሻዎች
1. እባክዎን 0.5MEDTA በእራስዎ ያዘጋጁ።
2. በ µg አር ኤን ኤ 1U DNAse I ይጠቀሙ።ነገር ግን፣ አር ኤን ኤው ከ1µg ያነሰ ከሆነ፣ እባክዎን 1U DNAse I ይጠቀሙ።
3. እባክዎን በሚሠራበት ጊዜ ኢንዛይሙን በበረዶ ላይ ያስቀምጡት.
