Superstart qPCR Premix plus-UNG HCB5071E ተለይቶ የቀረበ ምስል

ልዕለ ጀምር qPCR Premix plus-UNG

የድመት ቁጥር፡ HCB5071E

ጥቅል: 100RXN/1000RXN/10000RXN

ሊዮፊሊዝ ሊደረግ የሚችል

ፀረ-ሰው ማሻሻያ፣ 95℃፣ ከ1-5 ደቂቃ ትኩስ ጅምር

ከፍተኛ ስሜታዊነት እና ልዩነት

በዝቅተኛ ትኩረት ላይ የተረጋጋ ማወቂያ ፣ ከፍተኛ የፍሎረሰንት እሴት

ጥያቄ ላክ

የምርት ማብራሪያ

የምርት ዝርዝር

የድመት ቁጥር፡ HCB5071E

Superstart qPCR Premix plus-UNG በምርመራ ላይ የተመሰረተ ማወቂያን በመጠቀም ለሪል ታይም PCR የጥራት እና መጠናዊ ምላሾች የተነደፈ ልዩ ሪአጀንት ነው፣በተለይ ለላይፊላይዜሽን ሂደቶች የተሰራ።ትኩስ ጅምር ኤንዛይም ሆትስታርት ታክ ፕላስ (ዲጂ) በውስጡ የያዘው የTaq ኢንዛይም እንቅስቃሴ በክፍል ሙቀት ውስጥ የታሸገ ሲሆን ይህም በዝቅተኛ የሙቀት ሁኔታ ውስጥ በፕሪመር ልዩ ያልሆነ ማደንዘዣ ወይም የፕሪመር ዲመር መፈጠር ምክንያት የሚከሰተውን ልዩ ያልሆነ ማጉላት በተሳካ ሁኔታ ይከላከላል። የማጉላት ምላሽ ልዩነት.ይህ ሬጀንት ፈጣን ትኩስ ጅምርን ለማግኘት የተሻሻለ የqPCR ልዩ ቋት እና UNG/dUTP ፀረ-ብክለት ስርዓትን ይጠቀማል፣ ይህም የqPCR ምላሾችን ቅልጥፍና እና ስሜትን በእጅጉ ያሻሽላል።በተለያዩ የቁጥር ቦታዎች ላይ ጥሩ መደበኛ ኩርባዎችን ማግኘት እና የቁጥር መጠን በትክክል ማከናወን ይችላል ፣ ይህም በተቀረው PCR ምርቶች ወይም በአየር ብክለት ምክንያት የሚፈጠር የውሸት አወንታዊ ማጉላትን በተሳካ ሁኔታ ይከላከላል።ይህ ሬጀንት ከአብዛኛዎቹ የፍሎረሰንት መጠናዊ PCR መሳሪያዎች እንደ Applied Biosystems፣ Eppendorf፣ Bio-Rad እና Roche ወዘተ ካሉ አምራቾች ጋር ተኳሃኝ ነው፣ እና በ lyophilized መልክ ጥሩ መረጋጋትን ያሳያል።

ቀዳሚ፡ BsaI HCP1014A

ቀጣይ፡- ፕሮቲን ኬ (ፈሳሽ) HC4502A

Reagent ቅንብር

1. 5× HotstartPremix plus-UNG (Mg²⁺ነፃ) (ዲጂ)

2. 250 ሚሜ ኤምጂሲኤል₂

3. 4× ሊዮፕሮቴክታንት (አማራጭ)

የማከማቻ ሁኔታዎች

የረጅም ጊዜ ማከማቻ -20 ℃;በ 4 ℃ ውስጥ እስከ 3 ወር ድረስ ሊከማች ይችላል.ከመጠቀምዎ በፊት በደንብ ይቀላቀሉ እናተደጋጋሚ ቅዝቃዜን እና ማቅለጥ ያስወግዱ.

የብስክሌት ፕሮቶኮል

አሰራር	የሙቀት መጠን	ጊዜ	ዑደት
የምግብ መፈጨት	50℃	2 ደቂቃ	1
ፖሊሜሬዝ ማግበር	95 ℃	1 ~ 5 ደቂቃ	1
ዲናቸር	95 ℃	10 ~ 20 ሴ	40-50
ማሰር እና ማራዘም	56 ~ 64 ℃	20 ~ 60 ሴ	40-50

qPCR ፈሳሽ ምላሽ Sግንድ ዝግጅት

ቅንብር	25µL መጠን	50µL መጠን	የመጨረሻ ትኩረት
5× HotstartPremix plus-UNG(ሚግ²⁺ነፃ) (ዲጂ)	5µ ሊ	10µL	1×
250 ሚሜ ኤምጂሲኤል₂	0.45µL	0.9µL	4.5 ሚሜ
4× ሊዮፕሮቴክታንት¹	6.25µL	12.5µ ሊ	1×
25× ፕሪመር-ፕሮብ ድብልቅ²	1µ ሊ	2µ ሊ	1×
አብነት ዲ ኤን ኤ³	——	——	——
ddH₂O	እስከ 25µL	እስከ 50µL	——

1. ለፕሪመር የ 0.2μM የመጨረሻ ትኩረት አብዛኛውን ጊዜ ጥሩ ውጤት ያስገኛል;የምላሽ አፈጻጸም ደካማ ከሆነ፣ እንደ አስፈላጊነቱ ከ0.2-1μM ክልል ውስጥ የፕሪመር ትኩረትን ያስተካክሉ።ምርጥ ውህዶችን ለማግኘት የፍተሻ ማጎሪያው በተለምዶ በ0.1-0.3μM ክልል ውስጥ በቅልጥፍና ሙከራዎች ይሻሻላል።

2. በተለያዩ የአብነት ዓይነቶች ውስጥ የሚገኙት የዒላማ ጂኖች ቅጂ ቁጥር ይለያያል;አስፈላጊ ከሆነ ትክክለኛውን የአብነት የመደመር መጠን ለመወሰን የግራዲየንት ማቅለጫ ሊከናወን ይችላል.

3. ይህ ሥርዓት lyophilized ሊሆን ይችላል;ደንበኞች ይህንን ስርዓት ያለ ማቀዝቀዝ-ማድረቂያ መስፈርቶች ሲጠቀሙ ፣ 4 × ሊዮፕሮቴክታንት በተመረጠው ሊጨመር ይችላል ፣ የደረቁ ምርቶች ካሉ ፣ በፈሳሽ ሪጀንቶች ደረጃ የምርት አፈፃፀም ማረጋገጫ ወቅት ፣ ከሊፊሊዝድ ሲስተም አካላት ጋር ወጥነት ያለው መሆኑን ለማረጋገጥ 4 × lyoprotectant ማከል አለበት። እና ተፅዕኖዎች.

ስርዓቱ ጥቅም ላይ ሲውልd ለበረዶ-ማድረቅ, ያዘጋጁ ስርዓት as የሚከተለው፡-

ቅንብር	25µL ምላሽ ስርዓት
5 ×HotstartPremix plus-UNG (Mg²⁺ነፃ) (ዲጂ)	5µ ሊ
250 ሚሜ ኤምጂሲኤል₂	0.45µL
4× ሊዮፕሮቴክታንት	6.25µL
25× ፕሪመር-ፕሮብ ድብልቅ	1µ ሊ
ddH₂O	እስከ 18 ~ 20µL

* ለማድረቅ ሌሎች ስርዓቶች አስፈላጊ ከሆኑ እባክዎን በተናጠል ያማክሩ።

የሊዮፊላይዜሽን ሂደትss

አሰራር	የሙቀት መጠን	ጊዜ	ሁኔታ	ጫና
ቅድመ-ቅዝቃዜ	4℃	30 ደቂቃ	ያዝ	1 ኤቲኤም
	-50 ℃	60 ደቂቃ	ማቀዝቀዝ
	-50 ℃	180 ደቂቃ	ያዝ
የመጀመሪያ ደረጃ ማድረቅ	-30℃	60 ደቂቃ	ማሞቂያ	የመጨረሻው ቫክዩም
የመጀመሪያ ደረጃ ማድረቅ	-30℃	70 ደቂቃ	ያዝ	የመጨረሻው ቫክዩም
ሁለተኛ ደረጃ ማድረቅ	25℃	60 ደቂቃ	ማሞቂያ	የመጨረሻው ቫክዩም
ሁለተኛ ደረጃ ማድረቅ	25℃	300 ደቂቃ	ያዝ	የመጨረሻው ቫክዩም

1. ይህ የሊዮፊላይዜሽን ሂደት ለ25µL ምላሽ ስርዓት በቦታው ላይ የማድረቅ ሂደት ነው።ከሆነየሚቀዘቅዙ ዶቃዎች ወይም ሌሎች በቦታው ላይ በረዶ-ማድረቂያ ሂደቶች ያስፈልጋሉ፣ እባክዎን በተናጠል ይጠይቁ።

2. ከላይ ያለው የሊዮፊላይዜሽን ሂደት ለማጣቀሻ ብቻ ነው.የተለያዩ የምርት ዓይነቶች እና የተለያዩ የቀዘቀዘ-ማድረቂያዎች የተለያዩ መለኪያዎች አሏቸው, ስለዚህ በእውነተኛው መሰረት ማስተካከያዎች ሊደረጉ ይችላሉበአጠቃቀም ጊዜ ሁኔታዎች.

3. የተለያዩ የሊዮፊላይዜሽን ሂደቶች ለተለያዩ የሉፍሎች መጠኖች ተስማሚ ሊሆኑ ይችላሉምርቶች, ስለዚህ ለትልቅ ምርት በሚውሉበት ጊዜ በቂ የሙከራ ማረጋገጫ መከናወን አለበት.

lyophilize ለመጠቀም መመሪያd ዱቄት

1. የሊፊሊዝድ ዱቄት በአጭሩ ሴንትሪፉል;

2. ኑክሊክ አሲድ አብነት ወደ lyophilized ዱቄት ይጨምሩ እና እስከ 25µL ውሃ ይጨምሩ።

3. በሴንትሪፍግሽን በደንብ ይደባለቁ እና በማሽኑ ላይ ያሂዱ.

የጥራት ቁጥጥር:

1. ተግባራዊ ሙከራ: ስሜታዊነት, ልዩነት, የqPCR መራባት.

2. ምንም ውጫዊ የኒውክሊየስ እንቅስቃሴ የለም, ምንም ውጫዊ የ endo/exonuclease ብክለት የለም.

ቴክኒካዊ መረጃ:

1. Superstart qPCR Premix plus-UNG በ1~5 ደቂቃ ውስጥ ፈጣን ትኩስ መጀመርን የሚያስችል አዲስ ትኩስ ጅምር ኢንዛይም ይጠቀማል።በልዩ ቋት አጻጻፍ በኩል ለ multiplex fluorescent quantitative PCR ምላሾች ተስማሚ ነው።

2. የፍሎረሰንስ መጠናዊ PCR ገደብ ማወቂያን ስሜትን በእጅጉ የሚያሻሽል ከፍ ያለ ስፔሲፊኬሽን አለው፣የማጉላት ኩርባዎችን መደበኛ ማድረግ፣የፍሎረscence እሴት በዝቅተኛ የማጎሪያ አብነቶች ላይ ግልጽ የሆነ ማሻሻያ ያገኛል፣እንደ ከፍተኛ ትብነት ፍሎረሰንት መጠናዊ PCR ማወቂያ reagents።

3. ዝቅተኛ የማደንዘዣ የሙቀት መጠን ወይም ከ 200 ቢፒቢ ክፍልፋዮች በላይ ለሆኑ ፕሪመርዎች ባለ 3-ደረጃ ዘዴ ይመከራል።

4. የዲዩቲፒ አጠቃቀም ቅልጥፍና እና የ UNG ኢንዛይም ስሜት ለተለያዩ ዒላማ ጂኖች ይለያያሉ፣ ስለዚህ UNG ስርዓትን መጠቀም የመለየት ስሜት እንዲቀንስ ካደረገ ፣ የምላሽ ስርዓቱ መስተካከል እና ማሻሻል አለበት።የቴክኒክ ድጋፍ የሚያስፈልግ ከሆነ እባክዎን ኩባንያችንን ያነጋግሩ።

5. ከማጉላት በፊት እና በኋላ የተሰጡ ቦታዎችን እና ቧንቧዎችን ይጠቀሙ ፣ በሚሠራበት ጊዜ ጓንት ያድርጉ እና ብዙ ጊዜ ይተኩ ።በ PCR ምርቶች የናሙናዎችን ብክለት ለመቀነስ PCR ከተጠናቀቀ በኋላ የምላሽ ቱቦውን አይክፈቱ።