አንድ እርምጃ RT-qPCR SYBR አረንጓዴ ፕሪሚክስ
የድመት ቁጥር፡ HCB5140A
አንድ እርምጃ RT-qPCR Syber ግሪን ፕሪሚክስ በSYBR አረንጓዴ I ማቅለሚያ ላይ የተመሠረተ የፍሎረሰንስ ብዛት ነው።ጂን-ተኮር ፕሪመርቶችን በመጠቀም የተገላቢጦሽ ግልባጭ እና qPCR ምላሾች በአንድ ቱቦ ውስጥ ይጠናቀቃሉ ፣ ይህም ተደጋጋሚ የኬፕ መክፈቻ እና የቧንቧ ሥራን አስፈላጊነት ያስወግዳል ፣ የምርመራውን ውጤታማነት በእጅጉ ያሻሽላል እና የብክለት አደጋን ይቀንሳል።ለአር ኤን ኤ ናሙናዎች፣ ኪቱ ሙቀትን የሚቋቋም Reverse Transcriptase ለተቀላጠፈ cDNA ውህድ እና HotStart Taq DNA Polymerase ለቁጥር ማጉላት ይጠቀማል።በተመቻቸ ቋት ሲስተም የኪቱ ስሜታዊነት በከፍተኛ ደረጃ ለተገለጹ ኢላማዎች እስከ 0.1 ፒጂ እና በመጠኑ ለተገለጹ ኢላማዎች እስከ 1 ፒጂ ከፍ ሊል ይችላል።ኪቱ የዲኤንኤ ናሙናዎችን ለማጉላት እና ለመለካት ተስማሚ ነው።ከተለያዩ የዕፅዋትና የእንስሳት ናሙናዎች፣ ህዋሶች እና ረቂቅ ህዋሳት ስሱ የሆኑ ኑክሊክ አሲዶችን ለማወቅ እና ለመለካት ያስችላል።
አካላት
| No | ስም | ድምጽ | ድምጽ |
| 1 | የላቀ ቋት | 250 μል | 2 × 1.25 ሚሊ |
| 2 | የላቀ ኢንዛይም ድብልቅ | 20 μኤል | 200 μል |
| 3 | RNase ነፃ ኤች2O | 250 μል | 2 × 1.25 ሚሊ |
የማከማቻ ሁኔታዎች
ይህ ምርት በ -25 ~ -15 ℃ ከብርሃን ርቆ ለ 1 አመት መቀመጥ አለበት.
መመሪያዎች
1.Reaction ስርዓት ውቅርd
| አካላት | መጠን (μL) | መጠን (μL) | የመጨረሻ ትኩረት |
| የላቀ ቋት | 12.5 | 25 | 1× |
| የላቀ ኢንዛይም ድብልቅ | 1 | 2 | - |
| ወደፊት ፕሪመር (10 μሞል/ሊ)a | 0.5 | 1 | 0.2 ማይክሮሞል / ሊ |
| ተገላቢጦሽ ፕሪመር (10 μሞል/ሊ)a | 0.5 | 1 | 0.2 ማይክሮሞል / ሊ |
| አር ኤን ኤ ታምፕሌትb | X | X | - |
| RNase ነፃ ኤች2ኦc | ወደ 25 | ወደ 50 | - |
ማስታወሻዎች፡-
1) ሀ.ቲየመጨረሻው የፕሪመር ክምችት 0.2 μmol/L ነበር፣ እሱም እንደአግባቡ በ0.1 እና 1μሞል/ሊ መካከል ሊስተካከል ይችላል።
2) ለ.ሪአጀንቱ እጅግ በጣም ስሜታዊ ነው፣ አጠቃላይ አር ኤን ኤ በ1pg-1μg ክልል ውስጥ ያለው፣ እና የሰዎች ናሙናዎች መፈተሽ ጥሩ ግብአት 1 pg-100 ng አሳይቷል፣ ይህም እንደአግባቡ በ15-30 ክልል ውስጥ ያለውን አጠቃላይ የሲቲ እሴትን ይቆጣጠራል።
3) ሐ.የታለመውን የጂን ማጉላት ትክክለኛነት እና መራባት ለማረጋገጥ 20μL ወይም 50μL እንዲጠቀሙ ይመከራል።
4) መ.እባክዎን እጅግ በጣም ንጹህ በሆነው አግዳሚ ወንበር ላይ ይዘጋጁ እና ከኑክሌይስ ነፃ የሆኑ ምክሮችን እና የምላሽ ቱቦዎችን ይጠቀሙ።የማጣሪያ ካርቶን ያላቸው ምክሮች ይመከራሉ.የብክለት እና የኤሮሶል ብክለትን ያስወግዱ.
2.ምላሽ ፕሮግራም
| የዑደት እርምጃ | የሙቀት መጠን | ጊዜ | ዑደቶች |
| የተገላቢጦሽ ግልባጭ | 50℃a | 6 ደቂቃ | 1 |
| የመነሻ መነጠል | 95 ℃ | 5 ደቂቃ | 1 |
| የማጉላት ምላሽ | 95 ℃ | 15 ሰከንድ | 40 |
| 60℃b | 30 ሰከንድ | ||
| የማቅለጥ ኩርባ ደረጃ | የመሣሪያ ነባሪዎች | 1 | |
ማስታወሻዎች፡-
1) ሀ.በሙከራ ፍላጎቶች መሰረት የተገላቢጦሽ ግልባጭ ሙቀት ከ50-55°C መካከል ሊመረጥ ይችላል።ለዲኤንኤ ናሙናዎች፣ የተገላቢጦሽ የመገልበጥ ሂደት ሊቀር ይችላል።
2) ለ.በልዩ ሁኔታዎች የማራዘሚያ / የኤክስቴንሽን የሙቀት መጠን በፕሪመር ቲም እሴት መሰረት ማስተካከል ይቻላል, 60 ° ሴ ይመከራል.
ማስታወሻዎች
1. ይህ ምርት ለምርምር አገልግሎት ብቻ ነው.
2. እባክዎን ለደህንነትዎ ሲባል የላብራቶሪ ኮት እና የሚጣሉ ጓንቶችን ይጠቀሙ።
