Multiplex አንድ እርምጃ RT-qPCR Premix-UNG
የድመት ቁጥር፡ HCB5145A
Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus) እንደ አብነት አር ኤን ኤ ላይ የተመሰረተ ብዜት አሃዛዊ PCR ኪት ነው።በሙከራው ሂደት ውስጥ የተገላቢጦሽ ግልባጭ እና የቁጥር PCR በተመሳሳይ ቱቦ ውስጥ ተካሂደዋል, ይህም የሙከራ ስራውን ቀላል እና የብክለት አደጋን ይቀንሳል.በዚህ ኪት ውስጥ፣ የመጀመሪያው ሲዲኤንኤ በብቃት የተዋሃደ ሙቀትን በሚቋቋም Reverse Transcriptase እና በሆትስታርት ታግ ዲ ኤን ኤ ፖሊመሬሴ በቁጥር አሻሽሏል።ኪቱ በዋናነት የተመቻቸ የኤምፒ ቋት፣ የኢንዛይሞች ድብልቅ፣ ወዘተ ይዟል። የቋት መፍትሄው ቀድሞውንም MG ይዟል2+እና dNTP.በተጨማሪም ልዩ ያልሆነውን PCR ማጉላትን ውጤታማ በሆነ መንገድ የሚገቱ እና የበርካታ qPCR ምላሾችን የማጉላት ብቃትን የሚያሻሽሉ ነገሮች ተጨምረዋል።የኤሮሶል ብክለትን አደጋ ለመከላከል የ dUTP/UDG ስርዓት ተጨምሯል።
አካላት
1. መያዣ
2. ኢንዛይም ድብልቅ
ዝርዝር መግለጫ
| ትኩስ ጅምር | አብሮ የተሰራ ሙቅ ጅምር |
| የማወቂያ ዘዴ | የፕሪመር-ምርመራ ፍለጋ |
| PCR ዘዴ | አንድ እርምጃ RT-qPCR |
| ፖሊሜሬዝ | ታክ ዲ ኤን ኤ ፖሊመሬሴ |
| የናሙና ዓይነት | ዲ.ኤን.ኤ |
የማከማቻ ሁኔታዎች
ምርቱ በደረቅ በረዶ ይጫናል እና በ -25 ~ -15 ℃ ለ 1 አመት ሊከማች ይችላል.በተደጋጋሚ መራቅ አለበትበረዶ-ማቅለጥ.በተናጠል ለማስቀመጥ ይመከራል.
መመሪያዎች
1.ምላሽ ስርዓት
| አካላት | መጠን (μL) | የመጨረሻ ትኩረት |
| 2 × MP ቋት | 12.5 | 1× |
| ኢንዛይም ድብልቅ | 1 | - |
| የፕሪመር/የመመርመሪያ ድብልቅ (2.5 μM) | 3 | 0.3μኤም |
| አብነት አር ኤን ኤ | 1-10 | - |
| RNase ነፃ H2O | ወደ 25 | - |
ማስታወሻዎች፡-
ከመጠቀምዎ በፊት በደንብ መቀላቀልዎን ያረጋግጡ, በኃይለኛ ንዝረት ምክንያት ከመጠን በላይ አረፋዎችን ያስወግዱ.
ሀ.የፕራይመር ማጎሪያ፡ የፕራይመር ቅይጥ multiplex primerን ጨምሮ፣ እንደ ሁኔታው ጥሩው የፕሪመር ትኩረት ምናልባት በ0.l እና 1.0μM መካከል።
ለ.የፍተሻ ማጎሪያ፡ የፍተሻ ቅይጥ የፍሎረሰንት መለያ ልዩነት የፍሎረሰንት ቡድንን ጨምሮ፣ እንደ ሁኔታው ጥሩ የመመርመሪያ ትኩረት ምናልባት በ0.05 እና 0.5μM መካከል።
ሐ.የአብነት ማሟያ፡ qPCR በጣም ሚስጥራዊነት ያለው እና አብነቱን ለማሟሟት ይመከራል።የመቆጣጠሪያው ሲቲ እሴት በ20 እና 35 መካከል ተስማሚ ነው።
መ.የሥርዓት ዝግጅት: እባክዎን እጅግ በጣም ንጹህ በሆነው የሥራ ጠረጴዛ እና በፓይፕቶር እና በምላሽ ቱቦ ውስጥ ያለ ኒውክሊየስ ቀሪዎች ያዘጋጁ ።የጠመንጃውን ጭንቅላት ከማጣሪያ አካል ጋር እንዲጠቀሙ ይመከራል.የብክለት እና የኤሮሶል ብክለትን ያስወግዱ.
2. የተመቻቸ ብስክሌትፕሮቶኮል
| ዑደት ደረጃ | የሙቀት መጠን | ጊዜ | ዑደቶች |
| የተገላቢጦሽ ግልባጭ | 50℃ሀ | 20 ደቂቃ | 1 |
| መጀመሪያ-denaturation | 95 ℃ | 5 ደቂቃ | 1 |
| የማጉላት ምላሽ | 95 ℃ | 15 ሰከንድ |
40-45 |
| 60℃ b | 30 ሰከንድ c |
ማስታወሻዎች፡-
ሀ.የተገላቢጦሽ ግልባጭ፡ የሙቀት መጠኑ 42°ሴ ወይም 50°ሴን ሊመርጥ ይችላል።
ለ.የማጉላት ምላሽ: የሙቀት መጠኑ በቲኤም እሴት መሠረት በተዘጋጁት ፕሪሚኖች ተስተካክሏል.
ሐ.የፍሎረሰንት ሲግናል ማግኛ፡እባክዎ የሙከራ ሂደቱን በመሳሪያው መመሪያ መሰረት ያዘጋጁ።
ማስታወሻዎች
እባክዎን ጤናዎን እና ደህንነትዎን ለማረጋገጥ አስፈላጊውን PPE ይልበሱ፣ እንደ ላብ ኮት እና ጓንቶች።
