ራንሴ ኤ
Ribonuclease A (RNaseA) ሞለኪውላዊ ክብደት 13.7 ኪ.ዲ. የሚደርስ 4 ዲሰልፋይድ ቦንዶችን የያዘ ባለአንድ-ክር ፖሊፔፕታይድ ነው።RNase A በ C እና U ቅሪቶች ላይ ነጠላ-ክር ያለው አር ኤን ኤ የሚቀንስ endoribonuclease ነው።በተለይም ስንጥቅ በ5′-ribose of a ኑክሊዮታይድ እና በፎስፌት ቡድን 3′-ሪቦስ አጠገብ ባለው ፒሪሚዲን ኑክሊዮታይድ የተፈጠረውን የፎስፎዲስተር ቦንድ ይገነዘባል፣ስለዚህ 2፣ 3′-ሳይክሊክ ፎስፌትስ ወደ ተጓዳኝ 3 ሃይድሮሊዝድ ይደረጋል። ‹nucleoside phosphates (ለምሳሌ pG-pG-pC-pA-pG በ RNase A የተሰነጠቀ pG-pG-pCp እና A-PG)።RNase A ነጠላ-ክር ያለው አር ኤን ኤ በመክተፍ በጣም ንቁ ነው።የሚመከር የስራ ትኩረት 1-100μG/ml ነው፣ ከተለያዩ የምላሽ ስርዓቶች ጋር ተኳሃኝ።ዝቅተኛ የጨው ክምችት (0-100 mM NaCl) በ RNA-DNA hybridization የተፈጠሩ ነጠላ-ፈትል አር ኤን ኤ፣ ባለ ሁለት ክር አር ኤን ኤ እና አር ኤን ኤ ሰንሰለቶችን ለመቁረጥ ሊያገለግል ይችላል።ነገር ግን፣ በከፍተኛ የጨው ክምችት (≥0.3 M)፣ RNase A ብቻ በተለይ ነጠላ-ክር ያለው አር ኤን ኤ ይሰፋል።
RNase A በፕላዝማዲ ዲ ኤን ኤ ወይም ጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ዝግጅት ወቅት አር ኤን ኤን ለማስወገድ በብዛት ጥቅም ላይ ይውላል።በዝግጅቱ ሂደት ውስጥ ዲናሴ ንቁ መሆን አለመሆኑ በቀላሉ ምላሽን ሊጎዳ ይችላል።በውሃ መታጠቢያ ውስጥ ያለው የባህላዊ ዘዴ የዲ ኤን ኤስ እንቅስቃሴን ለማንቃት መጠቀም ይቻላል.ይህ ምርት DNase እና protease አልያዘም, እና ከመጠቀምዎ በፊት የሙቀት ሕክምና አያስፈልገውም.በተጨማሪም፣ ይህ ምርት በሞለኪውላዊ ባዮሎጂ ሙከራዎች ውስጥ እንደ RNase ጥበቃ ትንተና እና አር ኤን ኤ ቅደም ተከተል ትንታኔን መጠቀምም ይችላል።
የማከማቻ ሁኔታዎች
ምርቱ በ -25～-15 ℃ ላይ ሊከማች ይችላል፣ ለ 2 ዓመታት ያገለግላል።
መመሪያዎች
ይህ የ RNase A ማከማቻ መፍትሄ ለማዘጋጀት ከተለመዱት ዘዴዎች አንዱ ነው.እንዲሁም በ ሊዘጋጅ ይችላልበቤተ ሙከራ ውስጥ በባህላዊ ዘዴዎች መሠረት ሌሎች ዘዴዎች ወይም የማጣቀሻ ጽሑፎች (እንደበ 10 mM Tris-HCl ፣ pH 7.5 ወይም Tris-NaCl መፍትሄ ውስጥ በቀጥታ መሟሟት)
1. 10 mg/mL RNase A ማከማቻ መፍትሄ ለማዘጋጀት 10 ሚሜ ሶዲየም አሲቴት (pH 5.2) ይጠቀሙ።
2. በ 100 ℃ ለ 15 ደቂቃዎች ማሞቅ
3. ቀዝቃዛ ወደ ክፍል ሙቀት፣ 1/10 የ 1 M Tris-HCl (pH 7.4) ይጨምሩ፣ ፒኤች ወደ 7.4 ያስተካክሉ (ለለምሳሌ፣ 500 ሚሊ 10ግ/ሚሊ የ RNase ማከማቻ መፍትሄ 1M Tris-HCL፣ PH7.4 ይጨምሩ
4. ለቀዘቀዘ ማከማቻ በ -20 ℃ ንዑስ የታሸገ፣ ይህም እስከ 2 ዓመት ድረስ ሊረጋጋ ይችላል።
[ማስታወሻዎች]: የ RNaseA መፍትሄ በገለልተኛ ሁኔታዎች ውስጥ ሲፈላ, የ RNase ዝናብ ይከሰታል;በዝቅተኛ ፒኤች ላይ ቀቅለው, እና ዝናብ ካለ, ሊታይ ይችላል, ይህም በፕሮቲን ቆሻሻዎች ምክንያት ሊከሰት ይችላል.ከፈላ በኋላ ደለል ከተገኘ፣በከፍተኛ ፍጥነት ባለው ሴንትሪፍግሽን (13000rpm) እና ከዚያ በንዑስ የታሸገ ለበረዶ ማከማቻ ቆሻሻዎች ሊወገዱ ይችላሉ።
የምርት መረጃ
| ተመሳሳይ ቃላት | Ribonuclease I;የጣፊያ ራይቦኑክለስ;Ribonuclease 3'-pyrimidnooligonucleotidohydrolase;Rnase A;Endoribonulcease I |
| CAS ቁጥር. | 9001-99-4 እ.ኤ.አ |
| መልክ | ነጭ lyophilized ዱቄት |
| ሞለኪውላዊ ክብደት | ~ 13.7kDa (የአሚኖ አሲድ ቅደም ተከተል) |
| ፒ ዋጋ | 7.6 (የተግባር ክልል 6-10) |
| ተስማሚ የሙቀት መጠን | 60℃ (የእንቅስቃሴ ክልል 15-70℃) |
| የሚያነቃቃ ወኪል | Na2+.ኬ+ |
| ማገጃ | Rnase Inhibitor |
| የማነቃቂያ ዘዴ | በማሞቅ ሊነቃ አይችልም, ሴንትሪፉጅ አምድ ለመጠቀም ይመከራል |
| መነሻ | ቦቪን |
| መሟሟት | በውሃ ውስጥ የሚሟሟ (10 mg / ml) |
| በደረቁ ላይ ኪሳራ | ≤5.0% |
| የኢንዛይም እንቅስቃሴ | ≥60 የኩኒትስ ክፍሎች/ሚግ |
| አይዞኤሌክትሪክ ነጥብ | 9.6 |
ማስታወሻዎች
ለደህንነትዎ እና ለጤናዎ፣ እባክዎን ለስራ የሚውሉ የላብራቶሪ ኮት እና የሚጣሉ ጓንቶችን ያድርጉ።
