የቫይረስ ዲ ኤን ኤ / ኤን ኤ ኤክስትራክሽን ኪት
ኪት(HC1009B) ከፍተኛ ንፅህና ያላቸውን የቫይራል ኑክሊክ አሲዶች (ዲ ኤን ኤ/ኤን ኤ) ከተለያዩ ፈሳሽ ናሙናዎች ለምሳሌ እንደ ደም፣ ሴረም፣ ፕላዝማ እና ስዋብ ማጠቢያ ፈሳሽ በፍጥነት ማውጣት ይችላል፣ ይህም ትይዩ የሆኑ ናሙናዎችን በከፍተኛ መጠን እንዲሰራ ያስችላል።ኪቱ ልዩ የተከተተ ሱፐርፓራማግኔቲክ ሲሊኮን ላይ የተመሰረተ መግነጢሳዊ ዶቃዎችን ይጠቀማል።ልዩ በሆነ የማቋቋሚያ ስርዓት ውስጥ ከፕሮቲኖች እና ሌሎች ቆሻሻዎች ይልቅ ኑክሊክ አሲዶች በሃይድሮጂን ቦንዶች እና በኤሌክትሮስታቲክ ማሰሪያ ይጣበቃሉ።የተቀሩትን ፕሮቲኖች እና ጨዎችን ለማስወገድ ኑክሊክ አሲድ ያላቸው መግነጢሳዊ ዶቃዎች ይታጠባሉ።ዝቅተኛ የጨው ቋት በሚጠቀሙበት ጊዜ ኑክሊክ አሲዶች ከመግነጢሳዊ ዶቃዎች ይለቀቃሉ ፣ ስለሆነም የኑክሊክ አሲዶችን በፍጥነት የመለየት እና የማጥራት ዓላማን ለማሳካት ።አጠቃላይ የአሰራር ሂደቱ ቀላል፣ ፈጣን፣ ደህንነቱ የተጠበቀ እና ቀልጣፋ ነው፣ እና የተገኙት ኑክሊክ አሲዶች ለታችኛው ተፋሰስ ሙከራዎች እንደ በግልባጭ ፅሁፍ፣ ፒሲአር፣ qPCR፣ RT-PCR፣ RT-qPCR፣ የቀጣይ ትውልድ ቅደም ተከተል፣ ባዮቺፕ ትንተና፣ ወዘተ.
የማከማቻ ሁኔታዎች
በ 15 ~ 25 ℃ ያከማቹ እና በክፍል ሙቀት ያጓጉዙ።
መተግበሪያዎች
ደም፣ ሴረም፣ ፕላዝማ፣ swab eluent፣ tissue homogenate እና ሌሎችም።
የሙከራ ሂደት
1. ናሙና ማቀነባበር
1.1 እንደ ደም፣ ሴረም እና ፕላዝማ ባሉ ፈሳሽ ናሙናዎች ውስጥ ላሉ ቫይረሶች፡ 300μL ሱፐርናታንት ለማውጣት ያገለግላል።
2.2 ለስዋብ ናሙናዎች፡ መጠበቂያ ናሙናዎችን ወደ ናሙና ቱቦዎች ወደ ናሙና ቱቦዎች አስቀምጡ የጥበቃ መፍትሄ፣ አዙሪት ለ1 ደቂቃ እና ለማውጣት 300μL ሱፐርናታንት ይውሰዱ።
1.3 ለቫይረሶች በቲሹ ሆሞጋኒትስ፣ ቲሹሶክ መፍትሄዎች እና የአካባቢ ናሙናዎች፡ ናሙናዎችን ለ5-10 ደቂቃ ይቁሙ እና 300μL ሱፐርናታንት ይውሰዱ።
2. ዝግጅት ቅድመ ዝግጅትየታሸገ ሬጀንት
ቀድሞ የታሸጉትን ሪኤጀንቶችን ከመሳሪያው ውስጥ አውጡ፣ ገልብጠው እና ብዙ ጊዜ በማቀላቀል መግነጢሳዊ ዶቃዎችን እንደገና ለማንጠልጠል።ሬጀንቶች እና ማግኔቲክ ዶቃዎች ወደ ጉድጓዱ ግርጌ እንዲሰምጡ ለማድረግ ሳህኑን በቀስታ ያናውጡት።እባክዎን የሳህኑን አቅጣጫ ያረጋግጡ እና በጥንቃቄ የታሸገውን የአሉሚኒየም ፎይል ያጥፉት።
Δ ፈሳሽ እንዳይፈስ ለመከላከል የማተሚያውን ፊልም ሲነቅፉ ንዝረትን ያስወግዱ.
3. የ አውቶማቲክአቲክ መሳሪያ
3.1 ከ 96 ጥልቅ ጉድጓድ ሳህን ውስጥ 300μL ናሙና ወደ ጉድጓዶች 1 ወይም 7 ይጨምሩ (ውጤታማ በሆነው የጉድጓድ ቦታ ላይ ትኩረት ይስጡ)።የናሙና ግቤት መጠን ከ100-400 μL ጋር ተኳሃኝ ነው።
3.2 96-ጉድጓድ ጥልቅ ጉድጓድ ሳህን ወደ ኑክሊክ አሲዶች ማውጫ ውስጥ ያስገቡ።የማግኔቲክ ባር እጅጌዎችን ይልበሱ እና መግነጢሳዊ ዘንጎችን ሙሉ በሙሉ መሸፈናቸውን ያረጋግጡ።
3.3 ለራስ-ሰር ለማውጣት ፕሮግራሙን እንደሚከተለው ያዘጋጁ።
3.4 ከመውጣቱ በኋላ ኢሊዩን ከ 96 ጥልቅ ጉድጓድ ሳህን 6 ወይም 12 ከ 96 ጥልቅ ጉድጓድ (ውጤታማ በሆነው የጉድጓድ ቦታ ላይ ትኩረት ይስጡ) ወደ ንጹህ የኒውክሊየስ-ነጻ ሴንትሪፉጅ ቱቦ ያስተላልፉ።ወዲያውኑ ካልተጠቀሙበት እባክዎን ምርቶቹን በ -20 ℃ ላይ ያከማቹ።
ማስታወሻዎች
ለምርምር ብቻ ጥቅም ላይ ይውላል.በምርመራ ሂደቶች ውስጥ ጥቅም ላይ አይውልም.
1. የተገኘው ምርት ዲ ኤን ኤ / አር ኤን ኤ ነው.በቀዶ ጥገናው ወቅት አር ኤን ኤ በ RNase እንዳይበላሽ ለመከላከል ልዩ ትኩረት መስጠት ያስፈልጋል.ጥቅም ላይ የዋሉ እቃዎች እና ናሙናዎች መሰጠት አለባቸው.ሁሉም ቱቦዎች እና የ pipette ምክሮች ማምከን እና ከዲ ናስ/አር ናስ የጸዳ መሆን አለባቸው።ኦፕሬተሮች ከዱቄት ነፃ የሆኑ ጓንቶች እና ጭምብሎች ማድረግ አለባቸው።
2. እባክዎ ከመጠቀምዎ በፊት የመመሪያውን መመሪያ በጥንቃቄ ያንብቡ እና በመመሪያው መመሪያ መሰረት በጥብቅ ይሰሩ.የናሙና ማቀነባበር እጅግ በጣም ንጹህ በሆነ አግዳሚ ወንበር ወይም በባዮሎጂካል ደህንነት ካቢኔ ውስጥ መከናወን አለበት.
3. አውቶማቲክ ኑክሊክ አሲድ የማውጣት ዘዴ ከመጠቀምዎ በፊት እና በኋላ ለ 30 ደቂቃዎች በ UV መበከል አለበት.
4. ከተጣራ በኋላ በኤሉኤንት ውስጥ የሚቀሩ የማግኔቲክ ዶቃዎች ዱካዎች ሊኖሩ ይችላሉ፣ ስለዚህ ማግኔቲክ ዶቃዎችን ከመፈለግ ይቆጠቡ።መግነጢሳዊ ዶቃዎች ከተመኙ, በማግኔት ማቆሚያ ሊወገድ ይችላል.
5. ለተለያዩ የሬጀንቶች ስብስቦች ልዩ መመሪያዎች ከሌሉ, እባክዎን አይቀላቅሏቸው, እና እቃዎቹ በተፈቀደው ጊዜ ውስጥ ጥቅም ላይ መዋላቸውን ያረጋግጡ.
6. ሁሉንም ናሙናዎች እና ሬጀንትን በትክክል ያስወግዱ ፣ በደንብ ያጥፉ እና ሁሉንም የስራ ቦታዎች በ 75% ኢታኖል ያጽዱ።
